荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA荧光定量) |
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http://www.ganbingzixun.com 点击数:2770 更新时间:2009-11-15 【查看评论】 |
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荧光定量PCR技术(Fluorogenic Quantitative Polymerase Chain Reaction,FQ-PCR)于1996年由美国Applied Biosystems公司推出。该技术使PCR实现了从定性到定量的革命性飞跃,融汇了PCR的高灵敏性、DNA杂交的高特异性和光谱技术的高精确定量等优点,它有效地解决了其他方法很难处理的PCR污染的问题,而且自动化程度高。该技术以其明显的可靠性和优越性,迅速受到广泛的应用,已逐渐成为国际主流PCR技术,为PCR技术全面进入常规临床应用打开成功经验之门,同时也代表了PCR技术的发展方向。用此方法检测乙肝病毒,可直接定量其DNA的拷贝数目,真实显示其复制程度,客观反映病毒的活跃状态和繁殖能力的大小,为临床治疗和科学研究提供了最有力的指导依据。
一、定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能
HBV-DNA是乙肝病毒存在复制的直接证据,因此我们可以通过动态检测血清HBV-DNA含量而对各种乙肝病人病毒活动情况有更真实和全面的了解,使人们对乙肝的认识上升到一个更高的水平,对科研、临床以及流行病学研究均可提供有利的依据。
二、选择治疗时机
PCR方法检测患者血中病毒含量,有利于明确乙肝病毒活动复制情况,决定是否需要接受治疗以及采取何种治疗方案。
三、估计治疗反应
研究表明,血清乙肝病毒低拷贝者对干扰素治疗比高拷贝者要敏感。
四、观察药物疗效
在应用干扰素治疗治疗后,病人HBeAg可以有明显下降,但HBV-DNA的消失比HBeAg的消失早几周到几个月出现,更适于指导临床用药。
五、选择治疗方案
慢性乙肝病人使用干扰素治疗,只有30-50%的病人有反应;干扰素价格较昂贵并有一定副作用,因此对采用干扰素治疗的病人,在治疗前后作HBV-DNA浓度测定,有利于观察药物疗效,对治疗无反应者,应及时更换治疗方案,降低不必要的费用。
六、治疗后随访及检测复发
在抗病毒治疗结束后,用PCR方法继续监测HBV-DNA定量,定期复查,可以及时发现复发病人,及早给予治疗。
七、确定耐药菌株及选择合适的治疗方案。
八、抗病毒新药的研制
HBV定量法可在体外/动物实验中检测抗病毒药物应用后病毒量的变化。
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